|
基因芯片技术服务 m6A单碱基分辨率芯片 mRNA&lncRNA表观转录组芯片 circRNA表观转录组芯片 |
NGS测序技术服务 RNA m6A甲基化测序（MeRIP Seq） |
LC-MS mRNA碱基修饰检测 tRNA碱基修饰检测 |
PCR技术服务 m6A绝对定量RT-PCR技术服务 m6A单碱基位点PCR（MazF酶切法）技术服务 |
|
基因芯片技术服务 DNA甲基化芯片 DNA羟甲基化芯片 ChIP-chip |
NGS测序技术服务 DNA甲基化测序 DNA羟甲基化测序 染色质免疫共沉淀测序 |
PCR技术服务 MeDIP-qPCR hMeDIP-qPCR ChIP-qPCR |
|
蛋白相对定量 TMT标记定量技术 非标定量技术 |
蛋白修饰 TMT标记定量磷酸化 非标定量磷酸化 |
RNA/蛋白-蛋白相互作用 RNA-蛋白相互作用 蛋白-蛋白相互作用 |
爱尔兰皇家外科研院 (RCSI, Royal College of Surgeons in Ireland)的Catherine M. Greene博士长期从事肺部先天免疫调控机制的研究。该课题组利用Arraystar Human LncRNA芯片研究发现lncRNAs/mRNAs在囊性纤维化支气管上皮组织中异常表达。结合生物信息学分析分析和分子生物学验证，揭示了lncRNA在囊性纤维化过程中的作用。该研究成果刊登在国际期刊Int J Biochem & Cell Biol（影响因子4.24）。（芯片实验由Arraystar给予技术服务）
研究背景
囊性纤维化是由位于第7对染色体CF基因突变引起的常染色体隐性遗传病，主要影响胃肠道和呼吸系统，通常具有慢性梗阻性肺部病变、胰腺外分泌功能不良和汗液电解质异常升高的特征。一般带有隐性基因的杂合子占新生儿的2%～5%，2000～2500个新生儿中有一个患此病。近年来大量文献报道lncRNAs是调控基因表达的重要调控分子，在很多细胞活动中发挥关键作用，但是lncRNAs与囊性纤维化的关系尚不清楚。Catherine M. Greene课题组利用Arraystar Human LncRNA芯片首次揭示了lncRNAs在囊性纤维化过程中的作用。
研究思路
作者第一时间应用美国Arraystar Human LncRNA芯片检测囊性纤维化患者和正常对照支气管上皮组织中lncRNAs和mRNAs的表达水平。组间比较结果显示分别有1062个lncRNAs和720个mRNAs发生了明显的表达差异。GO分析表明差异表达mRNAs与炎症、Toll-like receptor(TLR) 信号通路和代谢调控密切相关。对于差异表达的lncRNAs，作者根据lncRNAs与邻近基因的相对关系进行统计学分类分析，并对已经报道的在其他疾病中发挥重要作用的lncRNAs进行PCR验证。进一步作者挑选与TLRs邻近lncRNAs进行PCR验证。
技术路线
结果展示
A． 聚类图显示差异表达的lncRNAs (左图)，部分差异表达的lncRNAs（右图）；
B． RT-PCR验证及与芯片结果的比较，lncRNA（左图）和mRNA（右图）；
C． 差异表达mRNAs的GO分析
研究意义
该研究揭示了lncRNAs/mRNAs在囊性纤维化过程中的差异表达。顺利获得GO分析、邻近基因分析等生物信息学手段和RT-PCR等分子生物学手段研究lncRNAs的功能。对于囊性纤维化的病理学研究具有重要的科研意义，为囊性纤维化的治疗给予了潜在的靶点。
原文出处
Long noncoding RNA are aberrantly expressed in vivo in the cystic fibrosis bronchial epithelium. Int J Biochem & Cell Biol. 2014.
